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国内用户用CUY21 EDITⅡ高效转染外源质粒入神经干细胞

信息来源:www.sddysc.cn  |   发布时间:2021年09月27日

河北联合大学基础医学院江小华课题组应用CUY21 EDIT 电转仪介导真核表达载体 pEGFP-N1 转染大鼠来源的神经干细胞( NSCs)获得成功。

江教授课题组研究人员多年致力于NSCs的转染。发现病毒感染有较高的转染效率,但具有潜在的致癌性非病毒转染的方法如脂质体法很难使NSCs 转染率提高到 20%。所以购买BEX公司的CUY21 EDIT II 超级多脉冲活体/细胞电转化仪进行电转染尝试,获得成功。NSCs的转染效率平均为 81.0% ,细胞存活率为 72.0% 


1CUY21 EDIT II 电转染pEGFP-N1质粒48h后观察。



2,脂质体Lipofectamine LTX转染 pEGFP-N1 质粒48h后观察。

由上图可见,在NSCs转染方面,CUY21 EDIT II的电转染与脂质体转染相比有很大优势。

电转技术是通过外加电场产生一定的电脉冲,诱导活细胞产生跨膜电位,当外加电场强度大于细胞膜穿孔的临界值,导致细胞膜产生小孔,使外源基因进入细胞内。电穿孔转染是在很短的一瞬间完成的,因此质粒能否在这一瞬间进入胞内,具有一定的偶然性,同时电转染效率受到很多方面的影响,包括电压、电阻、电容、电转前后温度的变化、反应物的性质和状态( DNA 和细胞、电转缓冲液、电转后培养及成分等多种因素控制。

BEX公司的CUY21 EDIT II 超级多脉冲活体/细胞电转化仪,可根据样品差异进行多脉冲选择,不需要特殊转染试剂即可高效转染难转细胞及活体CUY21 EDIT II可以对影响电转化结果的脉冲电压、驱动电压、脉冲时间、循环次数等关键参数进行优化,为提高转染效率奠定基础。

参考文献

CUY21EDIT Ⅱ超级多脉冲活体/细胞电转化仪转染外源基因至神经干细胞的优化方案。神经解剖学杂志,2015 31(3) : 322  326


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