当前位置:首页 >新闻中心 >新闻中心

BEX CUY21 EDIT II诱导小鼠DNA免疫应用分享

信息来源:www.ffsqblcj.cn  |   发布时间:2021年08月30日

疫苗对人们身体健康有着重大意义,不管是近期火热的新冠病毒疫苗,还是在研发中的如艾滋病疫苗、各种肿瘤疫苗等。在研发中不可或缺DNA疫苗诱导小鼠免疫,进一步评价疫苗效果。下面以两个案例给大家分享CUY21 EDIT II在诱导小鼠DNA免疫中的应用。

Case 1. Luciferase 表达可使生物发光成像但其对乳腺癌(4T1)鼠模型生长具有抑制作用


摘要:相关研究表明由于细胞荧光标记的异种性质,荧光标记肿瘤细胞植入免疫能力动物后,存在免疫消除的风险,而标记免疫反应也会改变标记肿瘤细胞的侵入性和转移潜力研究通过乳腺癌小鼠模型原位植入了荧光素酶(Luc)标记的乳腺癌4T1细胞后,具体探究其免疫消除的作用。通过小鼠植入4T1细胞和两个Luc表达克隆4T1luc2和4T1luc2D6细胞后发现,在小鼠体内两个克隆子代与亲代相比其增殖迁移侵袭能力均有降低。同时发现携带luc表达肿瘤的小鼠对luc显性CTL表位产生IFN-γ免疫反应,通过皮内诱导后,该反应可避免小鼠4T1luc2肿瘤生成。研究结果表明标记分子的的细胞反应对分子标记的肿瘤细胞的生长和转移活性存在限制,这一类细胞作为一种强工具可以改善针对癌症疫苗应用的免疫技术


方法:在雌性BALB/c小鼠在尾部底部两测注射20μg pVaxLuc2质粒或pVax1质粒,注射完成后采用针阵电极使用(BEX CUY21 EDIT II电转装置进行电击,每隔5天取血进行免疫评估。



结果:由图1可知小鼠经luc DNA免疫后均可抵抗4T1luc2肿瘤的生长。第9天时免疫荧光信号约为最初的15%,图1B可知BEX电转免疫效果要好于Demavax。

图1.DNA免疫使小鼠免受4T1luc2细胞肿瘤建立


参考文献: Ba Klaushev V P ,  Kilpel Inen A ,  Petkov S , et al. Luciferase Expression Allows Bioluminescence Imaging But Imposes Limitations on the Orthotopic Mouse (4T1) Model of Breast Cancer[J]. Scientific Reports, 2017, 7(1):7715.

Case 2. Codon 优化免疫方案可增强对野生型和耐药 HIV-1 反向转录酶的免疫反应,保持其 Th2 极性


摘要:随着病毒突变的不断进行,艾滋病毒的进化导致(多种)耐药艾滋病毒菌株的不断出现,脱氧核糖核酸疫苗需要进一步增强免疫原性。而RT是病毒复制的关键酶。它是抗逆转录病毒疗法的主要目标之一,也是实现对耐药性免疫控制的努力的主要重点。因此研究通过弱Th2免疫原及HIV-1反向转录酶(RT)对抗药性HIV-1的DNA疫苗进行了优化。实验设计了表达优化基因编码灭活野生型和耐药RT(RT-DNAs),并通过皮内注射和电转染对小鼠进行免疫,通过对RT 的多项参数优化增强了其 Th2 性能,增强HIV-1 DNA疫苗免疫活性


方法:每只小鼠接受两次皮内DNA注射,每次分别注射20μg pVaxLuc于尾巴底部的左侧和右侧。注射后使用多针电极进行电转染(cuy21 BEX)。在一次免疫15天或二次免疫21天后取血进行免疫检测。

结果:实验结果表明10 ms 100 V短脉冲具有较好的免疫效果,同时多款电极进行实验后发现DNA疫苗转染时叉型电极效果显著高于针式电极,在进行DNA疫苗转染实验时可优先选择该电极。

 

      图2.不同电极转染效果比较



文中特别提到BEX不仅可以现场检测电压和皮肤电阻,而且还对电流实施严格控制(如果电流超过限制,操作将禁用)。此措施可防止电流过大引起的伤害,更适合进一步临床前开发以及临床应用。



参考文献:Latanova A A ,  Petkov S ,  Kilpelainen A , et al. Codon optimization and improved delivery/immunization regimen enhance the immune response against wild-type and drug-resistant HIV-1 reverse transcriptase, preserving its Th2-polarity[J]. Scientific Reports, 2018, 8(1):8078-.


产品贴士

 

1.镊式电极(可用于皮肤,皮下肌肉,小鼠输卵管)



2.叉式电极(可用于鼠、兔皮肤、皮下组织)



3.针式电极(可用于鼠皮下组织,肌肉,肿瘤)